本項目開(kāi)發(fā)基于多色微球和磁納米顆粒的多元液滴數字免疫分析方法，進(jìn)而研發(fā)專(zhuān)用儀器。以不同顏色的微球標記不同種類(lèi)的捕獲抗體，以磁納米顆粒連接檢測抗體和半乳糖苷酶，將微球-抗原-磁顆粒免疫復合體和酶底物加至微流控免疫分析芯片的不同區域。液路控制系統驅動(dòng)免疫復合體進(jìn)入液滴生成系統。將免疫復合體與酶底物熒光半乳糖苷分裝到液滴中，液滴經(jīng)過(guò)溫控區后，依次穿過(guò)激光焦斑，發(fā)出的熒光用于定性定量抗原。
儀器由四色熒光檢測模塊、信號采集處理模塊、系統控制模塊組成（圖1）。四色熒光檢測模塊由三束480、520和640 nm 激發(fā)激光器和四個(gè)熒光探測器組成，可同時(shí)采集 FAM(500-520nm)、HEX(550-580 nm)、ROX(590-290 nm)和 CY5(660-715 nm)的熒光。激光通過(guò)光束擴展器，到達反射鏡形成一個(gè)平行光束，進(jìn)入物鏡，聚焦在芯片檢測通道，形成直徑為20μm 的圓形光斑，液滴流經(jīng)光斑時(shí)，被激發(fā)產(chǎn)生熒光，物鏡采集熒光。信息采集與數據處理模塊利用編程軟件采集熒光信號并處理熒光數據，實(shí)時(shí)識別、計數熒光信號。系統控制模塊控制注射泵、激光器、數據采集部件等電子設備的自動(dòng)運行。 本項目以微流控液滴為離散單元，開(kāi)發(fā)基于多色微球和磁納米顆粒的多元液滴數字免疫分析方法，進(jìn)而研發(fā)專(zhuān)用儀器。項目已經(jīng)成功研制原理樣機一臺，初步實(shí)現了腫瘤蛋白標志物的超靈敏檢測；已申請發(fā)明專(zhuān)利5項，授權3項；已發(fā)表蛋白計數檢測相關(guān)的 SCI 論文6篇。
